专利名称 | 一种提取森林土壤和凋落物中微生物总RNA的方法 |
专利类别 | |
申请号 | 201110251997.4 |
国内申请日期 | 2011-10-28 |
第一发明人 | 陈香碧 |
专利号 | ZL201110251997.4 |
专利授权日期 | 2012-11-28 |
专利摘要
本发明公开了一种提取森林土壤和凋落物中微生物总RNA的方法,其步骤:1、冷冻干燥森林土壤或凋落物样品后,磨细、混匀;2、粉末样品中加入焦碳酸二乙酯处理水,-70℃过夜;3、加入玻璃珠、十六烷基三甲基溴化铵缓冲液、十二烷基硫酸钠、硅藻土和酚/氯仿/异戊醇,混匀;4、将混合液剧烈振荡后,离心,得上清液;5、上清液中加入异硫氰酸胍,离心,得上清液;6、上清液中加入氯仿/异戊醇,离心,得上清液;7、上清液中加入聚乙二醇6000,放置,离心,弃掉上清液;8、经洗涤、溶解、DNA酶消化后,得RNA溶液;9、用琼脂糖凝胶电泳检测RNA的完整性,用核酸蛋白测定仪检测RNA的浓度和纯度。利用该方法提取的RNA产量高、完整性好、纯度较好。