专利名称 土壤微生物固碳酶提取的方法
专利类别
申请号 201110036309.2
国内申请日期 2011-02-11
第一发明人 葛体达
专利号 ZL201110036309.2
专利授权日期 2012-04-27
专利摘要
 本发明公开了一种土壤微生物固碳酶提取的方法,其步骤:A:把土壤依次加入预冷的离子去除剂、磷酸缓冲液,混匀后,于室温离心,收集沉淀;B:取A的沉淀物于细胞样品蛋白提取液中,涡旋混匀,冰浴中用超声波法破碎细胞,离心收集上清液,加入固体硫酸铵至溶解度后,振荡混匀,离心收集析出的蛋白,加溶解液溶解后,保存;C:将B的1,5–二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶蛋白溶液置于水浴中恢复酶活性,紫外分光光度计上测定1,5–二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶活性以每千克土壤固定CO2的纳摩尔数数的酶活力。方法简便、快速,测定结果重复性好,适合于大批量土壤微生物固碳关键酶1,5–二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶的提取及活性的测定。